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微量分液儀操作注意事項

2025-08-26 09:07:33

***、微量分液儀安全操作規(guī)范:規(guī)避人身與設(shè)備風(fēng)險

 

  個人防護(hù)

 

  操作時佩戴實(shí)驗服、護(hù)目鏡及防化學(xué)手套(如丁腈手套),防止試劑飛濺或泄漏接觸皮膚。

 

  處理揮發(fā)性或腐蝕性液體(如甲醇、濃鹽酸)時,需在通風(fēng)櫥內(nèi)操作,并佩戴防毒面具。

 

  防觸電與防爆

 

  確保設(shè)備接地良好,避免在潮濕環(huán)境或手濕時插拔電源;若設(shè)備外殼帶電,立即斷電并聯(lián)系維修。

 

  遠(yuǎn)離易燃易爆試劑(如乙醚、丙酮),分液區(qū)域禁止明火或靜電產(chǎn)生(如穿化纖衣物摩擦)。

 

  生物安全防護(hù)

 

  處理病原體或放射性樣本時,需在生物安全柜內(nèi)操作,分液后對廢液和耗材進(jìn)行高壓滅菌或?qū)S锰幚怼?/p>

 

  避免交叉污染:對不同樣本分液時,更換吸頭或使用***次性分液頭,禁止重復(fù)使用未清洗的吸頭。

 

  二、試劑與耗材管理:確保兼容性與穩(wěn)定性

 

  試劑選擇與預(yù)處理

 

  粘度適配:高粘度液體(如甘油、聚乙二醇)需提前加熱至室溫或稀釋,降低分液阻力;低粘度液體(如水、DMSO)可直接使用。

 

  揮發(fā)性控制:對乙醇、乙腈等易揮發(fā)試劑,分液后立即密封容器,減少體積損失;建議使用低揮發(fā)替代試劑(如異丙醇代替乙醇)。

 

  顆粒物過濾:含懸浮顆粒的試劑(如細(xì)胞培養(yǎng)基)需通過0.22μm濾膜過濾,防止吸頭或泵管堵塞。

 

  耗材匹配與檢查

 

  吸頭規(guī)格:根據(jù)分液體積選擇專用吸頭(如20μL、200μL、1000μL),避免混用導(dǎo)致漏液或精度下降。

 

  容器適配性:96孔板需選擇平底或錐底設(shè)計,確保液面檢測準(zhǔn)確;避免使用變形、破損或非標(biāo)準(zhǔn)容器(如自制玻璃管)。

 

  耗材質(zhì)量:定期檢查吸頭、泵管等易損件的狀態(tài),及時更換老化或變形的耗材;泵管建議每3個月更換***次。

 

  三、操作過程控制:優(yōu)化精度與效率

 

  分液參數(shù)設(shè)置

 

  速度控制:

 

  吸液速度:高粘度液體選擇低速(如0.5mL/min),低粘度液體選擇高速(如2mL/min)。

 

  分液速度:粘性液體降低速度至0.5mL/min,減少液滴掛壁;水性液體保持默認(rèn)速度(如1mL/min)。

 

  體積范圍:避免在量程極限(如***小體積或***大體積)附近操作,建議選擇量程的20%-80%以提高精度。

 

  分液模式選擇

 

  單通道模式:適用于逐孔分液或梯度稀釋(如ELISA加樣),需手動控制分液速度與間隔。

 

  多通道模式:支持8/12/96通道同步分液,適配高通量場景(如藥物篩選),需預(yù)設(shè)分液序列并檢查孔位對齊。

 

  自定義序列:通過軟件預(yù)設(shè)復(fù)雜分液流程(如多濃度加樣),需提前驗證序列邏輯是否正確。

 

  實(shí)時監(jiān)控與異常處理

 

  屏幕顯示:關(guān)注當(dāng)前分液體積、剩余液量和進(jìn)度條,異常時設(shè)備自動暫停并報警(如泵管堵塞、液面過低)。

 

  常見問題處理:

 

  分液量不足:檢查泵管是否老化、吸頭是否堵塞或液面是否過低。

 

  液滴掛壁:調(diào)整分液速度或增加噴嘴高度(參考設(shè)備手冊推薦值)。

 

  孔間交叉污染:增加清洗次數(shù)或更換***次性分液頭。

 

  四、校準(zhǔn)與驗證:保障數(shù)據(jù)可靠性

 

  校準(zhǔn)周期與方法

 

  日常校準(zhǔn):每周1次或更換試劑類型后需重新校準(zhǔn),使用與實(shí)驗試劑粘度相近的液體(如水、DMSO)。

 

  校準(zhǔn)方法:

 

  重力法:通過分析天平稱量分液前后容器重量,計算實(shí)際體積(1mg≈1μL水)。

 

  光電法:連接光電傳感器監(jiān)測液滴體積,適用于動態(tài)分液場景(如連續(xù)分液96孔板)。

 

  校準(zhǔn)記錄:建立校準(zhǔn)日志,包含校準(zhǔn)日期、設(shè)備型號、量程、方法、平均體積、CV、偏差、操作人等信息。

 

  精度驗證標(biāo)準(zhǔn)

 

  重復(fù)性驗證:對同***孔連續(xù)分液10次,計算變異系數(shù)(CV),要求CV<1%(優(yōu)質(zhì)設(shè)備可達(dá)CV<0.5%)。

 

  準(zhǔn)確性驗證:使用標(biāo)準(zhǔn)移液器(如Eppendorf Research plus)對比分液結(jié)果,相對誤差(RE)需≤±1%(參考ASTM E1157標(biāo)準(zhǔn))。


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